RNAprep Pure Tissue-Kit

Zur Aufreinigung von bis zu 100 µg Gesamt-RNA aus tierischen Geweben.

Das RNAprep Pure Tissue Kit bietet eine schnelle, einfache und kostengünstige Methode zur Reinigung von Gesamt-RNA aus tierischen Geweben unter Verwendung einer effektiven Spinsäule und eines einzigartigen Puffersystems. Das Kit enthält RNase-Free Spin Columns CR3 zur Aufreinigung hochwertiger RNA unter Verwendung der Silica-Membran-Technologie. Hochwertige Gesamt-RNA konnte in 40-50 Minuten mit hoher Reinheit gewonnen werden und ist frei von Protein- und genomischer DNA-Kontamination.

Katze. Nein	Packungsgröße
4992236	50 Vorbereitungen

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Produktdetail

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Merkmale

■ Optimierte Puffer für tierisches Gewebe machen den Prozess einfach und bequem.
■ Einzigartige DNase I minimiert die Kontamination mit genomischer DNA.
■ Die hochreine und gebrauchsfertige RNA eignet sich für sensible Downstream-Anwendungen.
■ Keine Phenol/Chloroform-Extraktion, keine LiCl- und Ethanol-Fällung und keine CsCl-Gradienten-Zentrifugation erforderlich, was den Prozess sicher und zuverlässig macht.

Anwendungen

■ RT-PCR.
■ Northern-Blot, Dot-Blot.
■ Echtzeit-PCR.
■ Chipanalyse.
■ PolyA-Screening, In-vitro-Translation, RNase-Schutzanalyse und molekulares Klonen.

Alle Produkte können für ODM/OEM angepasst werden. Für Details,Bitte klicken Sie auf kundenspezifischen Service (ODM/OEM)

Vorherige: RNAprep Pure Cell/Bakterien-Kit

Nächste: RNAprep Pure FFPE-Kit

Material: 20 mg Embryo (13 Tage), 15 mg Niere, 10 mg Leber, 15 mg Milz, 10 mg Thymus, 20 mg Lunge
Methode: Gesamt-RNA aus verschiedenen Gewebeproben von Ratten wurde mit dem RNAprep Pure Tissue Kit gereinigt.
Ergebnisse: Das Bild der Agarosegelelektrophorese ist oben gezeigt. Pro Spur wurden 2-4 µl 100 µl Eluate geladen.
M: TIANGEN-DNA-Marker III;
Spur 1-2: Embryo (13 Tage); Spur 3: Niere; Spur 4-6: Leber; Spur 7: Milz; Spur 8: Thymus; Spur 9: Lunge.
Die Elektrophorese wurde 30 min bei 6 V/cm auf 1% Agarosegel durchgeführt.

F: Spaltenblockierung

A-1 Zelllyse oder Homogenisierung nicht ausreichend

---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.

A-2 Probenmenge ist zu groß

---- Verringern Sie die verwendete Probenmenge oder erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer.

F: Niedrige RNA-Ausbeute

A-1 Unzureichende Zelllyse oder Homogenisierung

---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.

A-2 Probenmenge ist zu groß

----Bitte beachten Sie die maximale Verarbeitungskapazität.

A-3 RNA wird nicht vollständig von der Säule eluiert

---- Nach Zugabe von RNase-freiem Wasser einige Minuten ruhen lassen, bevor zentrifugiert wird.

A-4 Ethanol im Eluenten

---- Nach dem Spülen erneut zentrifugieren und Waschpuffer so weit wie möglich entfernen.

A-5 Zellkulturmedium wird nicht vollständig entfernt

---- Achten Sie beim Sammeln von Zellen darauf, das Kulturmedium so weit wie möglich zu entfernen.

A-6 Die in RNAstore gelagerten Zellen werden nicht effektiv zentrifugiert

---- Die RNAstore-Dichte ist höher als das durchschnittliche Zellkulturmedium; Daher sollte die Zentrifugalkraft erhöht werden. Es wird empfohlen, bei 3000x g zu zentrifugieren.

A-7 Niedriger RNA-Gehalt und -Häufigkeit in der Probe

---- Verwenden Sie eine positive Probe, um festzustellen, ob die geringe Ausbeute durch die Probe verursacht wird.

F: RNA-Abbau

A-1 Das Material ist nicht frisch

---- Frisches Gewebe sollte sofort in flüssigem Stickstoff aufbewahrt oder sofort in das RNAstore-Reagenz gegeben werden, um den Extraktionseffekt sicherzustellen.

A-2 Probenmenge ist zu groß

---- Probenmenge reduzieren.

A-3 RNase-Kontaminationn

----Obwohl der im Kit enthaltene Puffer keine RNase enthält, kann RNase während des Extraktionsprozesses leicht kontaminiert werden und sollte mit Vorsicht behandelt werden.

A-4 Elektrophorese-Verschmutzung

---- Ersetzen Sie den Elektrophoresepuffer und stellen Sie sicher, dass die Verbrauchsmaterialien und der Ladepuffer frei von RNase-Kontaminationen sind.

A-5 Zu hohe Belastung für Elektrophorese

---- Reduzieren Sie die Menge der Probenbeladung, die Beladung jedes Wells sollte 2 μg nicht überschreiten.

F: DNA-Kontamination

A-1 Probenmenge ist zu groß

---- Probenmenge reduzieren.

A-2 Einige Proben haben einen hohen DNA-Gehalt und können mit DNase behandelt werden.

----Führen Sie eine RNase-freie DNase-Behandlung mit der erhaltenen RNA-Lösung durch, und die RNA kann nach der Behandlung direkt für nachfolgende Experimente verwendet oder durch RNA-Reinigungskits weiter gereinigt werden.

F: Wie entfernt man RNase aus experimentellen Verbrauchsmaterialien und Glaswaren?

Für Glaswaren, 4 h bei 150°C gebacken. Bei Kunststoffbehältern 10 min in 0,5 M NaOH eingetaucht, dann gründlich mit RNase-freiem Wasser gespült und dann sterilisiert, um RNase vollständig zu entfernen. Die im Experiment verwendeten Reagenzien oder Lösungen, insbesondere Wasser, müssen frei von RNase sein. Verwenden Sie RNase-freies Wasser für alle Reagenzienzubereitungen (Wasser in eine saubere Glasflasche geben, DEPC bis zu einer Endkonzentration von 0,1% (V/V) hinzufügen, über Nacht schütteln und autoklavieren).

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