RNAprep Pure Plant Plus-Kit
Merkmale
■ Gezielt: Es ist speziell für schwer zu extrahierende Pflanzenproben wie Polysaccharide und polyphenolreiche Pflanzen formuliert. Der Prozess wird optimiert und die Ergebnisse sind zuverlässig.
■ Effiziente Entfernung von gDNA: Für die schnelle Entfernung von gDNA auf der Säule wird hocheffiziente DNase I mitgeliefert.
■ Einfach und schnell: RNA-Extraktionsexperimente können innerhalb von 1 Stunde abgeschlossen werden.
■ Sicher und geringe Toxizität: Es werden keine giftigen organischen Reagenzien wie Phenol und Chloroform benötigt.
Anwendungen
Dieses Kit kann direkt für verschiedene molekularbiologische Experimente wie RT-PCR, Echtzeit-PCR, Northern Blot, Dot Blot, PolyA-Screening, In-vitro-Translation, RNase-Schutzanalyse und Klonen usw. verwendet werden.
Alle Produkte können für ODM/OEM angepasst werden. Für Details,Bitte klicken Sie auf kundenspezifischen Service (ODM/OEM)
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Gesamt-RNA wurde aus 100 mg Fruchtfleisch von Bananen, Wassermelonen, Äpfeln und Birnen, Knollen von Süßkartoffeln und Kartoffeln, Blättern von Baumwolle, Rose, Luzerne, Reis bzw. weißen Kiefernnadeln unter Verwendung des RNAprep Pure Plant Plus Kit extrahiert. Pro Spur wurden 4-6 µl 30 µl Eluate geladen. M: TIANGEN-Marker III; Die Elektrophorese wurde 30 min bei 6 V/cm auf einer 1% Agarose durchgeführt. Ergebnisse: Das RNAprep Pure Plant Plus Kit kann hochreine, hohe Ausbeute und gute Integrität der Gesamt-RNA aus den Polysacchariden und polyphenolreichen Pflanzenproben extrahieren. |
A-1 Zelllyse oder Homogenisierung nicht ausreichend
---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.
A-2 Probenmenge ist zu groß
---- Verringern Sie die verwendete Probenmenge oder erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer.
A-1 Unzureichende Zelllyse oder Homogenisierung
---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.
A-2 Probenmenge ist zu groß
----Bitte beachten Sie die maximale Verarbeitungskapazität.
A-3 RNA wird nicht vollständig von der Säule eluiert
---- Nach Zugabe von RNase-freiem Wasser einige Minuten ruhen lassen, bevor zentrifugiert wird.
A-4 Ethanol im Eluenten
---- Nach dem Spülen erneut zentrifugieren und Waschpuffer so weit wie möglich entfernen.
A-5 Zellkulturmedium wird nicht vollständig entfernt
---- Achten Sie beim Sammeln von Zellen darauf, das Kulturmedium so weit wie möglich zu entfernen.
A-6 Die in RNAstore gelagerten Zellen werden nicht effektiv zentrifugiert
---- Die RNAstore-Dichte ist höher als das durchschnittliche Zellkulturmedium; Daher sollte die Zentrifugalkraft erhöht werden. Es wird empfohlen, bei 3000x g zu zentrifugieren.
A-7 Niedriger RNA-Gehalt und -Häufigkeit in der Probe
---- Verwenden Sie eine positive Probe, um festzustellen, ob die geringe Ausbeute durch die Probe verursacht wird.
A-1 Das Material ist nicht frisch
---- Frisches Gewebe sollte sofort in flüssigem Stickstoff aufbewahrt oder sofort in das RNAstore-Reagenz gegeben werden, um den Extraktionseffekt sicherzustellen.
A-2 Probenmenge ist zu groß
---- Probenmenge reduzieren.
A-3 RNase-Kontaminationn
----Obwohl der im Kit enthaltene Puffer keine RNase enthält, kann RNase während des Extraktionsprozesses leicht kontaminiert werden und sollte mit Vorsicht behandelt werden.
A-4 Elektrophorese-Verschmutzung
---- Ersetzen Sie den Elektrophoresepuffer und stellen Sie sicher, dass die Verbrauchsmaterialien und der Ladepuffer frei von RNase-Kontaminationen sind.
A-5 Zu hohe Belastung für Elektrophorese
---- Reduzieren Sie die Menge der Probenbeladung, die Beladung jedes Wells sollte 2 μg nicht überschreiten.
A-1 Probenmenge ist zu groß
---- Probenmenge reduzieren.
A-2 Einige Proben haben einen hohen DNA-Gehalt und können mit DNase behandelt werden.
----Führen Sie eine RNase-freie DNase-Behandlung mit der erhaltenen RNA-Lösung durch, und die RNA kann nach der Behandlung direkt für nachfolgende Experimente verwendet oder durch RNA-Reinigungskits weiter gereinigt werden.
Für Glaswaren, 4 h bei 150°C gebacken. Bei Kunststoffbehältern 10 min in 0,5 M NaOH eingetaucht, dann gründlich mit RNase-freiem Wasser gespült und dann sterilisiert, um RNase vollständig zu entfernen. Die im Experiment verwendeten Reagenzien oder Lösungen, insbesondere Wasser, müssen frei von RNase sein. Verwenden Sie RNase-freies Wasser für alle Reagenzienzubereitungen (Wasser in eine saubere Glasflasche geben, DEPC bis zu einer Endkonzentration von 0,1% (V/V) hinzufügen, über Nacht schütteln und autoklavieren).
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