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RNAprep Pure Cell/Bakterien-Kit

Zur Aufreinigung hochwertiger Gesamt-RNA aus Zellen und Bakterien.

Das RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit bietet eine schnelle, einfache und kostengünstige Methode zur Reinigung von Gesamt-RNA aus kultivierten Zellen und Bakterienproben unter Verwendung einer effektiven Spinsäule und eines einzigartigen Puffersystems. Das Kit enthält eine RNase-Free Spin Column CR3 zur Reinigung hochwertiger RNA unter Verwendung der Silica-Membran-Technologie. Hochwertige Gesamt-RNA konnte in 30-40 Minuten mit hoher Reinheit gewonnen werden und ist frei von Protein- und genomischer DNA-Kontamination.

Katze. Nein	Packungsgröße
4992235	50 Vorbereitungen

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Produktdetail

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FAQ

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Merkmale

■ Optimierte Puffer und Protokolle für kultivierte Zellen und Bakterienproben machen den Prozess einfach und bequem.
■ Einzigartige DNase I minimiert die Kontamination mit genomischer DNA.
■ Einzigartige RNase-freie Filtrationssäulen CS beseitigen andere Kontaminationen.
■ Die hochreine und gebrauchsfertige RNA eignet sich für sensible Downstream-Anwendungen.
■ Keine Phenol-/Chloroform-Extraktion, keine LiCl- und Ethanol-Fällung, keine CsCl-Gradientenzentrifugation erforderlich, was den Prozess sicher und zuverlässig macht.

Anwendungen

■ RT-PCR.
■ Northern-Blot, Dot-Blot.
■ Echtzeit-PCR.
■ Chipanalyse.
■ PolyA-Screening, In-vitro-Translation, RNase-Schutzanalyse und molekulares Klonen.

Alle Produkte können für ODM/OEM angepasst werden. Für Details,Bitte klicken Sie auf kundenspezifischen Service (ODM/OEM)

Vorherige: TRNzol Universalreagenz

Nächste: RNAprep Pure Tissue-Kit

	Material: Menschliche Jurkat-Zellen (1×10 .)⁶ ) Methode: Die Gesamt-RNA von humanen Jukat-Zellen wurde mit dem RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit isoliert. Ergebnisse: Siehe obiges Bild der Agarosegelelektrophorese. Pro Spur wurden 2-4 µl 50 µl Eluate geladen. Die Elektrophorese wurde 30 min bei 6 V/cm auf 1% Agarosegel durchgeführt.
	Material: TOP10 E.coli (1×10 .)⁸) Methode: Die Gesamt-RNA von TOP10 E.coli wurde mit dem RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit isoliert. Ergebnisse: Siehe obiges Bild der Agarosegelelektrophorese. Pro Spur wurden 2-4 µl 50 µl Eluate geladen. Die Elektrophorese wurde 30 min bei 6 V/cm auf 1% Agarosegel durchgeführt.

F: Spaltenblockierung

A-1 Zelllyse oder Homogenisierung nicht ausreichend

---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.

A-2 Probenmenge ist zu groß

---- Verringern Sie die verwendete Probenmenge oder erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer.

F: Niedrige RNA-Ausbeute

A-1 Unzureichende Zelllyse oder Homogenisierung

---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.

A-2 Probenmenge ist zu groß

----Bitte beachten Sie die maximale Verarbeitungskapazität.

A-3 RNA wird nicht vollständig von der Säule eluiert

---- Nach Zugabe von RNase-freiem Wasser einige Minuten ruhen lassen, bevor zentrifugiert wird.

A-4 Ethanol im Eluenten

---- Nach dem Spülen erneut zentrifugieren und Waschpuffer so weit wie möglich entfernen.

A-5 Zellkulturmedium wird nicht vollständig entfernt

---- Achten Sie beim Sammeln von Zellen darauf, das Kulturmedium so weit wie möglich zu entfernen.

A-6 Die in RNAstore gelagerten Zellen werden nicht effektiv zentrifugiert

---- Die RNAstore-Dichte ist höher als das durchschnittliche Zellkulturmedium; Daher sollte die Zentrifugalkraft erhöht werden. Es wird empfohlen, bei 3000x g zu zentrifugieren.

A-7 Niedriger RNA-Gehalt und -Häufigkeit in der Probe

---- Verwenden Sie eine positive Probe, um festzustellen, ob die geringe Ausbeute durch die Probe verursacht wird.

F: RNA-Abbau

A-1 Das Material ist nicht frisch

---- Frisches Gewebe sollte sofort in flüssigem Stickstoff aufbewahrt oder sofort in das RNAstore-Reagenz gegeben werden, um den Extraktionseffekt sicherzustellen.

A-2 Probenmenge ist zu groß

---- Probenmenge reduzieren.

A-3 RNase-Kontaminationn

----Obwohl der im Kit enthaltene Puffer keine RNase enthält, kann RNase während des Extraktionsprozesses leicht kontaminiert werden und sollte mit Vorsicht behandelt werden.

A-4 Elektrophorese-Verschmutzung

---- Ersetzen Sie den Elektrophoresepuffer und stellen Sie sicher, dass die Verbrauchsmaterialien und der Ladepuffer frei von RNase-Kontaminationen sind.

A-5 Zu hohe Belastung für Elektrophorese

---- Reduzieren Sie die Menge der Probenbeladung, die Beladung jedes Wells sollte 2 μg nicht überschreiten.

F: DNA-Kontamination

A-1 Probenmenge ist zu groß

---- Probenmenge reduzieren.

A-2 Einige Proben haben einen hohen DNA-Gehalt und können mit DNase behandelt werden.

----Führen Sie eine RNase-freie DNase-Behandlung mit der erhaltenen RNA-Lösung durch, und die RNA kann nach der Behandlung direkt für nachfolgende Experimente verwendet oder durch RNA-Reinigungskits weiter gereinigt werden.

F: Wie entfernt man RNase aus experimentellen Verbrauchsmaterialien und Glaswaren?

Für Glaswaren, 4 h bei 150°C gebacken. Bei Kunststoffbehältern 10 min in 0,5 M NaOH eingetaucht, dann gründlich mit RNase-freiem Wasser gespült und dann sterilisiert, um RNase vollständig zu entfernen. Die im Experiment verwendeten Reagenzien oder Lösungen, insbesondere Wasser, müssen frei von RNase sein. Verwenden Sie RNase-freies Wasser für alle Reagenzienzubereitungen (Wasser in eine saubere Glasflasche geben, DEPC bis zu einer Endkonzentration von 0,1% (V/V) hinzufügen, über Nacht schütteln und autoklavieren).

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