RNAprep Pure Hi-Blood-Kit
Merkmale
■ Geeignet für frisches Vollblut verschiedener Spezies, einfach zu bedienen.
■ Ausgestattet mit RNase-freier Filtrationssäule CS zur effektiven Entfernung von Verunreinigungen.
■ Der speziell formulierte Puffer kann eine effiziente und stabile RNA-Extraktion für eine Vielzahl von Downstream-Experimenten gewährleisten.
■ Sicherer und zuverlässiger Betrieb, keine Phenol-/Chloroform-Extraktion erforderlich.
Anwendungen
RT-PCR, Northern Blot, RT-qPCR, Chipanalyse, Hochdurchsatz-Sequenzierung, PolyA-Screening, RNase-Schutzanalyse, In-vitro-Translation usw.
Alle Produkte können für ODM/OEM angepasst werden. Für Details,Bitte klicken Sie auf kundenspezifischen Service (ODM/OEM)
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Abbildung 1. RNA gereinigt aus 100 μl frischem Rattenblut in verschiedenen Antikoagulanzien mit dem RNAprep Pure Hi-Blood Kit. Pro Spur wurden 4-6 µl 50 µl Eluate geladen. M: TIANGEN-DNA-Marker III. |
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Abbildung 2. RNA, die mit dem RNAprep Pure Hi-Blood Kit aus 100 μl frischem Mausblut gereinigt wurde. Pro Spur wurden 4-6 µl 50 µl Eluate geladen. M: TIANGEN-DNA-Marker III. |
A-1 Zelllyse oder Homogenisierung nicht ausreichend
---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.
A-2 Probenmenge ist zu groß
---- Verringern Sie die verwendete Probenmenge oder erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer.
A-1 Unzureichende Zelllyse oder Homogenisierung
---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.
A-2 Probenmenge ist zu groß
----Bitte beachten Sie die maximale Verarbeitungskapazität.
A-3 RNA wird nicht vollständig von der Säule eluiert
---- Nach Zugabe von RNase-freiem Wasser einige Minuten ruhen lassen, bevor zentrifugiert wird.
A-4 Ethanol im Eluenten
---- Nach dem Spülen erneut zentrifugieren und Waschpuffer so weit wie möglich entfernen.
A-5 Zellkulturmedium wird nicht vollständig entfernt
---- Achten Sie beim Sammeln von Zellen darauf, das Kulturmedium so weit wie möglich zu entfernen.
A-6 Die in RNAstore gelagerten Zellen werden nicht effektiv zentrifugiert
---- Die RNAstore-Dichte ist höher als das durchschnittliche Zellkulturmedium; Daher sollte die Zentrifugalkraft erhöht werden. Es wird empfohlen, bei 3000x g zu zentrifugieren.
A-7 Niedriger RNA-Gehalt und -Häufigkeit in der Probe
---- Verwenden Sie eine positive Probe, um festzustellen, ob die geringe Ausbeute durch die Probe verursacht wird.
A-1 Das Material ist nicht frisch
---- Frisches Gewebe sollte sofort in flüssigem Stickstoff aufbewahrt oder sofort in das RNAstore-Reagenz gegeben werden, um den Extraktionseffekt sicherzustellen.
A-2 Probenmenge ist zu groß
---- Probenmenge reduzieren.
A-3 RNase-Kontaminationn
----Obwohl der im Kit enthaltene Puffer keine RNase enthält, kann RNase während des Extraktionsprozesses leicht kontaminiert werden und sollte mit Vorsicht behandelt werden.
A-4 Elektrophorese-Verschmutzung
---- Ersetzen Sie den Elektrophoresepuffer und stellen Sie sicher, dass die Verbrauchsmaterialien und der Ladepuffer frei von RNase-Kontaminationen sind.
A-5 Zu hohe Belastung für Elektrophorese
---- Reduzieren Sie die Menge der Probenbeladung, die Beladung jedes Wells sollte 2 μg nicht überschreiten.
A-1 Probenmenge ist zu groß
---- Probenmenge reduzieren.
A-2 Einige Proben haben einen hohen DNA-Gehalt und können mit DNase behandelt werden.
----Führen Sie eine RNase-freie DNase-Behandlung mit der erhaltenen RNA-Lösung durch, und die RNA kann nach der Behandlung direkt für nachfolgende Experimente verwendet oder durch RNA-Reinigungskits weiter gereinigt werden.
Für Glaswaren, 4 h bei 150°C gebacken. Bei Kunststoffbehältern 10 min in 0,5 M NaOH eingetaucht, dann gründlich mit RNase-freiem Wasser gespült und dann sterilisiert, um RNase vollständig zu entfernen. Die im Experiment verwendeten Reagenzien oder Lösungen, insbesondere Wasser, müssen frei von RNase sein. Verwenden Sie RNase-freies Wasser für alle Reagenzienzubereitungen (Wasser in eine saubere Glasflasche geben, DEPC bis zu einer Endkonzentration von 0,1% (V/V) hinzufügen, über Nacht schütteln und autoklavieren).
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