RNAprep Pure Micro-Kit

Zur Aufreinigung hochwertiger Gesamt-RNA aus Mikromengen von Geweben oder Zellen.

Das RNAprep Pure Micro Kit verwendet eine hocheffiziente, Nukleinsäure-spezifische Zentrifugaladsorptionssäule und ein einzigartiges Puffersystem, um schnell Gesamt-RNA aus einer Vielzahl verschiedener Arten von Mikroproben zu extrahieren. Dieses Kit enthält Träger-RNA, die leicht Spuren von Nukleinsäuren aus dem System einfangen kann. Die Extraktion von RNA mit diesem Kit ist bequem, schnell und mit hoher Ausbeute reproduzierbar. Die Reaktion kann innerhalb von 30-40 Minuten abgeschlossen sein. Das Kit kann selektiv alle RNA entfernen, die <200 nt ist (5,8S rRNA, 5S rRNA und tRNAs usw.), während alle RNA, die >200 nt ist, angereichert, isoliert und gereinigt wird. Die extrahierte Gesamt-RNA ist extrem rein und frei von DNA- und Proteinkontaminationen.

Katze. Nein	Packungsgröße
4992859	50 Vorbereitungen

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Merkmale

■ Kann hochwertige RNA aus Spuren von Proben wie mikroseziertem Gewebe, fibrösem Gewebe und Zellen aufreinigen.
■ Einzigartige DNase I minimiert die Kontamination mit genomischer DNA.
■ Die hochreine und gebrauchsfertige RNA eignet sich für sensible Downstream-Anwendungen.
■ Keine Phenol-/Chloroform-Extraktion, keine LiCl- und Ethanol-Fällung, keine CsCl-Gradientenzentrifugation erforderlich, was den Prozess sicher und zuverlässig macht.

Anwendungen

■ RT-PCR.
■ Northern-Blot, Dot-Blot.
■ Echtzeit-PCR.
■ Chipanalyse.
■ PolyA-Screening, In-vitro-Translation, RNase-Schutzanalyse und molekulares Klonen.

Alle Produkte können für ODM/OEM angepasst werden. Für Details,Bitte klicken Sie auf kundenspezifischen Service (ODM/OEM)

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Nächste: TRNzol Universalreagenz

Gesamt-RNA von 1×10⁶, 1×10⁵, 1×10⁴, 1×10³, 1×10², 10 Hela-Zellen wurden unter Verwendung des RNAprep Pure Micro Kit extrahiert. Die RT-qPCR wurde mit dem Quant qRT-PCR (SYBR Green) Kit von TIANGEN durchgeführt.

F: Spaltenblockierung

A-1 Zelllyse oder Homogenisierung nicht ausreichend

---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.

A-2 Probenmenge ist zu groß

---- Verringern Sie die verwendete Probenmenge oder erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer.

F: Niedrige RNA-Ausbeute

A-1 Unzureichende Zelllyse oder Homogenisierung

---- Reduzieren Sie den Probenverbrauch, erhöhen Sie die Menge an Lysepuffer, erhöhen Sie die Homogenisierungs- und Lysezeit.

A-2 Probenmenge ist zu groß

----Bitte beachten Sie die maximale Verarbeitungskapazität.

A-3 RNA wird nicht vollständig von der Säule eluiert

---- Nach Zugabe von RNase-freiem Wasser einige Minuten ruhen lassen, bevor zentrifugiert wird.

A-4 Ethanol im Eluenten

---- Nach dem Spülen erneut zentrifugieren und Waschpuffer so weit wie möglich entfernen.

A-5 Zellkulturmedium wird nicht vollständig entfernt

---- Achten Sie beim Sammeln von Zellen darauf, das Kulturmedium so weit wie möglich zu entfernen.

A-6 Die in RNAstore gelagerten Zellen werden nicht effektiv zentrifugiert

---- Die RNAstore-Dichte ist höher als das durchschnittliche Zellkulturmedium; Daher sollte die Zentrifugalkraft erhöht werden. Es wird empfohlen, bei 3000x g zu zentrifugieren.

A-7 Niedriger RNA-Gehalt und -Häufigkeit in der Probe

---- Verwenden Sie eine positive Probe, um festzustellen, ob die geringe Ausbeute durch die Probe verursacht wird.

F: RNA-Abbau

A-1 Das Material ist nicht frisch

---- Frisches Gewebe sollte sofort in flüssigem Stickstoff aufbewahrt oder sofort in das RNAstore-Reagenz gegeben werden, um den Extraktionseffekt sicherzustellen.

A-2 Probenmenge ist zu groß

---- Probenmenge reduzieren.

A-3 RNase-Kontaminationn

----Obwohl der im Kit enthaltene Puffer keine RNase enthält, kann RNase während des Extraktionsprozesses leicht kontaminiert werden und sollte mit Vorsicht behandelt werden.

A-4 Elektrophorese-Verschmutzung

---- Ersetzen Sie den Elektrophoresepuffer und stellen Sie sicher, dass die Verbrauchsmaterialien und der Ladepuffer frei von RNase-Kontaminationen sind.

A-5 Zu hohe Belastung für Elektrophorese

---- Reduzieren Sie die Menge der Probenbeladung, die Beladung jedes Wells sollte 2 μg nicht überschreiten.

F: DNA-Kontamination

A-1 Probenmenge ist zu groß

---- Probenmenge reduzieren.

A-2 Einige Proben haben einen hohen DNA-Gehalt und können mit DNase behandelt werden.

----Führen Sie eine RNase-freie DNase-Behandlung mit der erhaltenen RNA-Lösung durch, und die RNA kann nach der Behandlung direkt für nachfolgende Experimente verwendet oder durch RNA-Reinigungskits weiter gereinigt werden.

F: Wie entfernt man RNase aus experimentellen Verbrauchsmaterialien und Glaswaren?

Für Glaswaren, 4 h bei 150°C gebacken. Bei Kunststoffbehältern 10 min in 0,5 M NaOH eingetaucht, dann gründlich mit RNase-freiem Wasser gespült und dann sterilisiert, um RNase vollständig zu entfernen. Die im Experiment verwendeten Reagenzien oder Lösungen, insbesondere Wasser, müssen frei von RNase sein. Verwenden Sie RNase-freies Wasser für alle Reagenzienzubereitungen (Wasser in eine saubere Glasflasche geben, DEPC bis zu einer Endkonzentration von 0,1% (V/V) hinzufügen, über Nacht schütteln und autoklavieren).

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